成果名称: ROBO2基因在鸡新城疫抗病育种中的作用及其分子机制
完成单位: 广东省农业科学院动物科学研究所
主要人员: 罗成龙、计坚、李莹、何静怡、舒鼎铭
介绍:

    本项目来源于国家自然科学基金-青年科学基金项目,项目总经费为25万元。ROBO2基因功能的深入研究对于从育种角度实施新城疫的防控具有重要意义。

    本项目首先通过eQTL策略找到多个与ROBO2相关的免疫基因,进一步确认了ROBO2基因与鸡的免疫应答具有密切关系。其次,利用免疫荧光技术发现ROBO2蛋白与部分新城疫病毒共定位,利用病毒铺敷蛋白印迹技术鉴定出ROBO2蛋白与鸡新城疫病毒蛋白可以结合,且不同ROBO2基因变异对新城疫病毒侵入细胞的数量不同,细胞内ROBO2基因表达和新城疫病毒的含量同步发生变化,表明ROBO2基因可以是鸡新城疫病毒受体或结合蛋白,但ROBO2可能是新城疫病毒的抑制基因。另外,成功培养转化ROBO2基因上rs15354805位点不同基因型鸡树突状细胞并获得RNAi沉默ROBO2基因的鸡树突状细胞、鸡胚成纤维细胞和淋巴细胞;新城疫病毒接毒后细胞内ROBO2基因表达量下降,rs15354805位点不同基因型树突状细胞 的的敏感性不同,其中ROBO2基因的表达GG型高于AA型,而IL6和INF-γ基因的表达则相反,影响鸡树突状细胞成熟的CCR6和CCR7基因的表达量GG型个体分别下降和上升更多, 表明ROBO2基因的表达间接影响鸡树突状细胞成熟;而GG基因型树突状细胞中影响白细胞趋化的XCR1基因的表达要高于AA基因型树突状细胞,同时随接毒时间变长而出现近细胞膜上点状聚集出现细胞单极化,表明ROBO2基因可以影响新城疫病毒成熟的树突状细胞迁移;结合前期全基因组关联分析和脾脏转录组试验结果,综上可知ROBO2蛋白通过与新城疫病毒的结合与抑制作用,间接影响树突状细胞的成熟与迁移,从而调节树突状细胞与淋巴细胞相互作用导致不同基因型个体对新城疫病毒的免疫应答存在差异。

    上述研究结 果为新城疫抗病育种的实施提供了新思路。已累计发表论文5篇,获授权发明专利2件,获中华农业科技奖1项,实现转化收益361万元,入选省级以上人才计划2人,培养研究生3名。

批准登记号: 粤科成登(2)字【2018】0293
登记日期: 2018-07-04
研究起止时间: 2015.01 至2017.12
所属行业: 农、林、牧、渔业
所属高新技术类别: 现代农业
评价单位名称: 国家自然科学基金委
评价日期: 2018.02.28