本项目属于中医药应用技术类，受国家自然科学基金等基金资助。慢性乙型肝炎（CHB）的免疫逃避是临床治疗的难点，树突状细胞(DC)抗原递呈功能低下、PD-1/PD-L1信号通路抑制及Th17/Treg细胞失衡构成免疫耐受的主要环节。中医药治疗CHB不易产生耐药性，起效后作用稳定持久，"反跳"现象少。本项目以中医"肾虚疫毒内伏肝血"的伏气理论与现代免疫分子机制结合，研究补肾清毒法治疗CHB机制。借助CHB患者、HBV转基因小鼠，运用体外树突状细胞培养，Elispot 、Pentamer-FACS、定量PCR技术等研究方法，从CHB患者DC抗原递呈能力，PD-1/PD-L1信号通路和Th17/Treg细胞亚群数量及功能变化，探讨HBV免疫耐受的机理以及补肾清毒法抗HBV可能的作用靶点和机制，阐明补肾清毒法治疗CHB的免疫活化机制。 研究结果表明：

    1.补肾清毒法可上调CHB患者成熟DC细胞表达共刺激分子CD80、CD86，能改善CHB患者DC成熟度，提高DC表面表型的表达；

    2.补肾清毒法能使CHB患者PD-1升高，PD-L1降低，PD-L2升高，表明补肾清毒法可能通过调节PD-L1/PD-L2平衡，而不是通过降低PD-1影响PD-1/PD-L1信号通路；

    3.CHB患者外周血Treg、IL-17、IL-10、TGF-β表达增加,补肾清毒法能显著降低CHB外周血Treg细胞表达频率；

    4.补肾清毒法治疗后CHB患者外周血特异性CTL细胞数量明显的上升, Perforin、GranzymeB、IFN-γ表达呈上升趋势，尤其是细胞因子IFN-γ，表明补肾清毒法可能通过增加特异性CTL细胞数量和改善活化CTL分泌细胞因子的能力；

    5.补肾清毒法联合核苷酸药物能较快降低中医临床证候评分，持续且稳定地降低HBV-DNA、转氨酶（ALT）,效果优于核苷酸类似物的单独使用。6.补肾清毒法能改善HBV转基因小鼠肝组织炎症、降低血清IL-17浓度、提高IFN-r浓度，并有提高CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞的比例的趋势，但对血清HBV-DNA无明显影响；
    本研究成果揭示了HBV持续感染的免疫逃避与中医伏气理论"肾虚邪伏"病机密切相关，揭示慢性乙肝伏气病机的本质，阐明了补肾清毒法治疗CHB的免疫耐受分子机制和作用靶点。补肾清毒法通过提高DC成熟度、DC抗原提呈能力、调节PD-1/PD-L1信号通路和Th17/Treg免疫平衡发挥治疗作用。补肾清毒法治疗乙肝作用不是直接杀灭病毒，而通过改善机体的免疫功能、影响机体免疫耐受状态而发挥长期治疗作用。本研究为补肾清毒法治疗慢性乙型肝炎提供科学的依据和新的思路，对临床具有指导意义。