本项目名称：鸡球虫药物靶标丙二酰单酰辅酶A：ACP转酰基酶的结构及作用机制初步研究；项目编号：31201902；课题来源：国家自然科学基金委；计划类别：青年项目，国家级投入23万元。长链脂肪酸是所有生命活动不可或缺的物质之一，大多数寄生性原虫，只能通过不同于其宿主的 II 型脂肪酸代谢途径（ FASII）才能最终合成：而丙二酰单酰辅酶 A： ACP转酰基酶（ Malony-CoA:ACP trabsacylase, MACT）作为 FASII 中的关键酶，被认为是研制新型抗原虫药物的靶标，药靶分子结构和作用机制解析是当前药物研制的技术瓶颈。本课题组前期研究基础证实对养鸡业最为严重的柔嫩艾美耳球虫（ Eimeria tenella）MCAT 可以作为研制抗 E. tenella 药物的靶标。

    本项目利用稀疏矩阵法和坐滴法蒸发扩散技术对 EtMACT 和 EtMACT/ACP 复合物进行蛋白结晶，通过 X-射线衍射分析解析其空间构想和活性中心及其表面结合口袋的小分子化合物，借助分子对接原理和分析技术，利用商业和公共数据库筛选获得具有效应的小分子化合物 104 种；分析显示 S92、 R117 与 H214 三个氨基酸残疾构成了 EtMCAT 的活性中心，利用定点突变技术制备 EtMCAT:S92P、 EtMCAT: R117K 和 EtMCAT: H214N，酶活性实验发现 3 个突变体较 EtMCAT（ 100%）的活性分别为 59%、 35%、 5%。

    通过体外抑制动力学分析小分子化合物的抑制效果；并在细胞培养平台上，建立了以 Real time RT-PCR技术为基础的药物筛选技术，利用该平台筛选到特异性抑制剂 2 种 corytuberine 和hexachlorophene，该研究结果将为新型抗球虫药物的研制提供理论基础和技术储备。