1． 课题来源： （1）课题类型：广东省省级科技计划项目农村科技领域计划 （2）课题来源单位：广东省科学技术厅 （3）课题名称：生物杀虫制剂-昆虫病原线虫新剂型的研发与应用 （4）课题编号：2014A020208075 2． 课题背景： 昆虫病原线虫是新型的生物杀虫剂，具有寄主范围广、能主动搜寻害虫、易于人工大量培养、对人畜和环境安全等优点，目前已经商业化生产及销售，为害虫的综合治理带来了显著的成效。然而昆虫病原线虫不耐干燥的特性阻碍了其应用的拓展。诱导昆虫病原线虫进入低湿休眠状态可以降低代谢，提高其环境耐受力及储存稳定性，延长昆虫病原线虫的贮存时间。采用吸附物质作为介质贮存昆虫病原线虫的效果因线虫种类的不同而有所不同，这与线虫本身对干燥耐受能力的强弱有关。昆虫病原线虫响应干燥胁迫的分子机制尚不明确。研究昆虫病原线虫响应干燥胁迫的功能基因，将为其干燥耐力的提高奠定基础，对于促进昆虫病原线虫剂型的发展以及产业化应用具有重要意义。 本项目组在昆虫病原线虫产业化应用、线虫与共生细菌共生关系研究等方面处于国际领先水平。项目成员已掌握了开展研究所需的相关生物技术，具备了坚实、成熟的技术基础，拥有完整的、新式的实验场地以及开展研究所需的必要设备。研究团队已开展的昆虫病原线虫干燥品系和吸附介质的前期筛选等实验，为进一步的剂型配制提供了研究开展的基础和依据。在昆虫病原线虫共生细菌基因组信息学分析方面的研究经验也是对昆虫病原线虫转录组分析的基础。这些条件能保证研究的顺利开展。

    2． 技术原理及性能指标 （1）建立了渗透压干燥和相对湿度干燥2种昆虫病原线虫干燥耐性测定的方法； （2）测定了不同昆虫病原线虫的渗透压干燥耐性及渗透压干燥诱导后耐热能力的差异； （3）测定了不同昆虫病原线虫在三种相对湿度干燥不同时间后的存活率及感染力； （4）采用转录组测序技术分析了5种昆虫病原线虫在干燥胁迫下的基因转录情况并对差异表达的基因进行分析； （5）检测了与干燥耐性相关的基因在5种昆虫病原线虫中的转录情况； （6）检测了多个基因在不同品种和品系昆虫病原线虫在渗透压干燥及未干燥条件下的转录情况； （7）研究了已市场化应用的5种昆虫病原线虫与硅藻土、蛭石粉、腐殖土等三种贮存介质混配后的贮存效果以及防霉剂对贮存过程的影响； （8）测定了昆虫病原线虫对蔬菜重要害虫黄曲条跳甲幼虫的田间防控效果； （9）研制了2个昆虫病原线虫的新产品。

    3． 技术的创造性与先进性 项目首次研究了昆虫病原线虫在剂型产品中的分子反应，利用腐殖土等介质配制昆虫病原线虫新剂型用于储存、运输及田间应用，采用高通量测序分析多种昆虫病原线虫在干燥环境下的转录组情况。研究配制的新剂型可以使昆虫病原线虫耐受室温的长期储存及运输，降低昆虫病原线虫的使用成本，提高经济效益。昆虫病原线虫防治害虫的应用，有利于促进环境和生态建设、发展我省的绿色杀虫制剂产业，具有广阔的应用前景。

    4． 技术的成熟程度，适用范围及安全性 项目研究配制昆虫病原线虫新剂型的技术成熟，可以使昆虫病原线虫耐受长期储存及运输，在田间使用方便，保持了昆虫病原线虫对害虫的毒力，降低了昆虫病原线虫的使用成本。昆虫病原线虫防治害虫的适用性广，对人类和环境安全，可有效减少化学农药的使用量，降低化学农药给生态环境和人体健康带来的威胁。

     5． 应用情况及存在的问题 通过在田间应用昆虫病原线虫的新剂型，可以降低昆虫病原线虫的使用成本，提高经济效益，害虫防控效果得到农户的肯定。昆虫病原线虫使用成本的降低，将有利于进一步推广昆虫病原线虫的应用，减少化学农药的大量使用所造成的污染，保护生态环境，提高农产品的产量和质量。通过在全国农业技术推广服务中心举办的绿色防控技术培训班中对来自全国各地的技术人员进行昆虫病原线虫应用技术的相关培训，以及对昆虫病原线虫生产企业人员进行昆虫病原线虫生产及剂型配制技术的培训，极大地推进了项目研究成果的应用。 研究成果所生产的昆虫病原线虫制剂作为生物农药在害虫防治中的应用需要更多的资金来开展推广，因此既需要省科技厅加大资助力度，又需要通过与企业合作共同应用，以促进我省病虫害生物防治和绿色杀虫制剂产业的发展。