①课题来源与背景 本课题来源于国家自然科学基金，旨在阐明垂体腺瘤演变过程中某些关键 miRNA 失衡表达的促瘤机制，并确立某些特异性 miRNA 作为该瘤诊断、预后分析和综合治疗的有效分子标记。

    ②研究目的与意义 垂体腺瘤是来源于垂体前叶常见的颅内原发性肿瘤，该类肿瘤病理学上属于良性肿瘤，但由于肿瘤本身的占位效应，功能性腺瘤所引发的神经内分泌功能紊乱及临床治疗引起的垂体功能低下，常给患者造成严重危害。本研究拟选取经过检验的差异表达的 miRNA 构建pre-miRNA 载体和反义寡核苷酸探针，体外转染垂体肿瘤细胞系和原代培养的细胞，用功能分类基因芯片观察细胞增殖与凋亡基因，原癌及抑癌基因，PTTG 蛋白， MMP2 和MMP9，及成纤维细胞活化蛋白等生物学通路上基因的变化，以期了解 miRNAs 究竟通过何种机制调控的垂体腺瘤发生发展。

    ③主要论点与论据 本课题组先前的实验证实，垂体腺瘤与正常垂体中存在差异表达的 miRNA。在此基础上，我们进一步用上海康成生物科技有限公司最新推出的 10.0版本 miRNA全基因组检测平台，对中山大学附属第一医院 30 例垂体腺瘤进行 miRNA 表达状况分析，发现不同大小、不同病理类型垂体腺瘤间及药物治疗前后的 GH 腺瘤间有多个差异表达的 miRNA，同时用 RT-PCR 验证了部分差异表达的 miRNA。通过互联网上 miRNA 靶基因预测软件，我们预测到这些差异表达的 miRNA 调节的靶基因包括：细胞周期素（cyclin）等细胞增殖与凋亡基因，Jun-B等细胞信号传导蛋白基因，垂体肿瘤转化基因（PTTG），基质金属蛋白酶 2 和 9（MMP2和 MMP9）等细胞外基质成份，胰岛素样生长因子（IGF）、生长抑素受体（SSTR1–5）等生长因子及其受体基因。

     ④创见与创新 （1）本课题中miRNA在垂体腺瘤中差异表达状况的详尽阐明不仅有助于miRNA调控功能的深入研究，亦有助于垂体腺瘤发病机制的探讨。（2）Exiqon 公司提供 miRCURY™芯片的核心优势---专利 Locked Nucleic Acid（LNA，铆定核酸）技术，LNA 探针最适合应用于 miRNA 芯片。芯片既能为后基因组时代科学研究提供强大的技术支持，又能提供高通量的新一代分子诊断技术平台。（3）功能分类基因芯片将微列阵技术与特定生物学通路的最新知识有机结合，剔除了基因芯片上对研究对象毫无意义的基因，其灵敏度高、准确可靠、重复性好的优越性已广为国际科学界认可。SuperArray 公司的功能分类基因芯片可以同时测定 84 个信号通路（细胞凋亡和细胞周期、肿瘤转化、细胞外基质与黏连分子、信号转导等）相关的基因。亦是本研究采用的核心技术和创新之处。（4）本研究主要探讨差异表达 miRNA 与垂体腺瘤发生、发展的关系，应用 miRNA表达谱芯片技术探讨垂体腺瘤组织和正常垂体中miRNAs差异表达谱及相关靶基因的蛋白表达状况，探讨某些特征性分子事件在垂体腺瘤演变过程中的作用；分析不同大小、不同病理类型垂体腺瘤间，药物治疗前后的 GH 腺瘤间 miRNAs 差异表达谱，了解不同的垂体腺瘤间 miRNA 分子特征；分析垂体 GH 腺瘤细胞凋亡和细胞周期、肿瘤基因、细胞外基质与黏连分子及信号转导等生物学通路基因改变；进一步确立能指导综合治疗的分子标记物；希望能把特异性 miRNA 作为药物治疗的靶点引入垂体腺瘤的基因治疗中，为垂体腺瘤治疗提供一定的理论和实验基础。

    ⑤研究成果及存在的问题 本课题组取得以下成果：（1）GH 垂体腺瘤方面： 1) 在 GH 垂体腺瘤和正常垂体中共有 52 个 miRNAs 存在差异；2) 在兰瑞肽治疗和未治疗的 GH 垂体腺瘤中共有 13 个 miRNAs 存在差异；3) 在微腺瘤和大腺瘤中共有 9 个 miRNAs 存在差异；4) SSA 反应型和非反应型则有 7 个 miRNAs 存在差异。（2）无功能垂体腺瘤方面：我们还应用基因芯片技术检测了无功能垂体腺瘤与正常垂体中microRNAs 的表达情况，发现与正常垂体相比，无功能垂体腺瘤中有 20 个 microRNAs显著上调，18 个 microRNAs 明显下调。从我们的研究结果可以看出，miRNAs 广泛参与了垂体腺瘤的发展和演化过程，在国内为首次对垂体腺瘤中的微小分子 RNA 进行了系统研究。我们的研究为垂体腺瘤的发病机制提供了新的依据，并且如果有后续的研究，可能会发现垂体腺瘤特异性的早期诊断和判断预后的指标。但是由于我们的课题只有一年的时间，并且标本收集要有一个累积的过程，时间比较紧张，并且经费有限，所以关于后续的功能研究尚未有明确进展。

    ⑥成果总体情况：已发表1 篇SCI 文章，1篇国内核心期刊，培养3名硕士研究生。