1.课题来源与背景：课题来源于广东省科学技术厅地方计划。葡萄膜恶性黑色素瘤（UM）是一种成人最常见的原发性眼内恶性肿瘤，在国内其发病率仅次于发生于儿童的视网膜母细胞瘤，居眼内原发性恶性肿瘤的第二位，主要来源于葡萄膜黑色素细胞。目前的治疗方法包括定期随访、敷贴治疗、外放疗、激光光凝、光动力疗法、温热治疗、局部切除、眼内切除和系统化疗等多种治疗方案。但疗效均不甚确切，且葡萄膜黑瘤对多种化疗药物具有较高的耐药性，使得目前最主要、最根本的方法仍然是行眼球摘除术，给病人造成极大的痛苦。我们的研究已表明，93.3%的UM中端粒酶活性呈高表达，与国外的研究结果基本一致。故抑制其端粒酶活性，有可能成为UM治疗中极具前景的新方法。端粒酶的活性与眼部肿瘤的发生、眼部组织的衰老有密切关系。2004年及2008年，在广东省自然科学基金博士启动项目及广东省科技计划项目的支持下，我们已经用少部分眼黑色素瘤患者初步检测到葡萄膜黑色素瘤端粒酶活性呈高表达；并初步发现干扰素及顺铂可做为端粒酶抑制剂引起葡萄膜黑色素瘤细胞的端粒酶活性降低，使细胞发生凋亡，并呈浓度依赖性及时间依赖性，端粒酶活性降低的同时，细胞抑制率升高，并具有相关性。已有相关文章发表在中华眼科杂志。

     2. 研究目的与意义：通过本研究，明确端粒酶抑制剂teloRZ和AZT分别及联合作用下，对体外培养的人眼黑色素瘤OCM-1细胞系的端粒酶活性下调作用及引起细胞凋亡的增殖抑制作用。并探索最佳用药途径及用量，观察不良反应及并发症。期望通过研究UM端粒酶活性的表达，探索有效的抑制端粒酶活性的方法，为UM的治疗提供新的选择。

     3. 主要论点与论据： 恶性肿瘤的发生与端粒酶活性增高有关，近年的研究表明，端粒酶的活化表达在许多恶性肿瘤获得无限生长能力中起着重要作用。研究发现去除端粒酶的活性，癌细胞的端粒将逐渐缩短并失去其无限增殖能力。鉴于此，端粒酶已被视为一个广泛的肿瘤标志。随着对端粒酶在细胞永生化过程中的重要作用的认识，抑制端粒酶的活性，阻止端粒的修复及肿瘤细胞的永生化（永生化是细胞成为恶性的一个必经阶段）可能能阻止恶性肿瘤的发生发展过程，从而为肿瘤的治疗开辟新的途径。因此，开发有效的端粒酶抑制剂已经成为抗肿瘤药物研究的热点。目前已有研究表明，某些传统的抗肿瘤药物对全身肿瘤的端粒酶活性有抑制作用。但其作用机制是否与其他抗端粒酶活性的途径如端粒酶相关基因的表达或细胞周期调节作用相重叠，尚不清楚。目前已有运用常规的化疗药物成功地全身肿瘤端粒酶活性的报道，近来的研究表明，端粒酶的活性与眼部肿瘤的发生、眼部组织的衰老有密切关系。我们的初步研究也已表明，93.3%的UM中端粒酶活性呈高表达，与国外的研究结果基本一致。故抑制其端粒酶活性，有可能成为UM治疗中极具前景的新方法。目前关于端粒酶与UM关系的研究仍然较少，国内尚未见报告，且国内外文献均未见到有关研究端粒酶表达的影响因素及端粒酶抑制剂在眼部肿瘤中应用的报道。因此，研究UM端粒酶活性的表达，探索有效的抑制端粒酶活性的方法，对于探讨UM新的治疗方案，具有重要的理论价值和实际意义。

     4.创见与创新： 1）本项目根据我们前期的研究结果提出新的设想，运用分子生物学技术首次将脂质体介导的核酶真核表达质粒Pxj-neo-telo RZ转入UM的裸鼠移植瘤中，进行端粒酶抑制剂开发方面的实验研究，为UM的治疗开辟一个新的领域。 2）国、内外首次研究端粒酶抑制剂teloRZ和AZT分别及联合作用，对体外培养的人眼黑色素瘤OCM-1细胞系的端粒酶活性下调作用及引起细胞凋亡的增殖抑制作用，并探讨其相互关系。 3)研究齐多夫定（AZT）作为端粒酶抑制剂对UM细胞端粒酶活性的下调作用和对其c—myc基因及hTERT（端粒酶逆转录酶）表达的影响，探讨端粒酶活性降低同细胞抑制率的关系。国内、外尚未见报导。 4、)国、内外首次使用体外培养的恶性黑色素瘤细胞系OCM-1建立裸鼠的人眼UM的原位移植瘤模型。提供了更接近人眼性质特点的UM药物试验平台。

    5.社会经济效益：1）通过本研究，明确端粒酶抑制剂teloRZ和AZT分别及联合作用下，对体外培养的人眼黑色素瘤OCM-1细胞系的端粒酶活性下调作用及引起细胞凋亡的增殖抑制作用。 2）通过裸鼠模型，研究在体内状况下teloRZ和AZT对人眼葡萄膜黑色素移植瘤的治疗作用，并探索最佳用药途径及用量，观察不良反应及并发症。 3）我国人口众多，病人绝对数量庞大，但由于技术限制，使得95％的患者不得不接受眼球摘除，本项目可为大多数患者解除摘眼痛苦，在愈发重视人文医学和人性化治疗的今天，可带来极大的社会效益。 4）本疗法技术先进，肿瘤治疗前后相关的治疗及辅助检查较多，相应的可带来较好的经济效益。

     6. 历年获奖情况：无