①课题来源与背景：本课题来源：广东省科研计划项目，项目名称：犬细小病毒PCR-HRM鉴别诊断方法的建立及其应用，项目编号：2015A030401066028。背景：犬细小病毒病又叫病毒性肠炎、传染性肠炎，是由犬细小病毒（canine parvovirus，CPV）感染引起的一种急性、接触性、高度致死性传染病，临床以呕吐、出血性肠炎、白细胞减少为主要特征，发病率高达50％～100％，死亡率为30～50％。疫苗免疫仍然是当前控制CPV的主要方法，目前临床上普遍使用的疫苗有荷兰英特威二联疫苗和美国辉瑞卫佳四联苗，但其疫苗毒株均是80年代由CPV2型野毒株弱化而来（目前全球已无CPV2型野毒流行）。近年来我国CPV临床发病率明显升高，据报道，江浙地区腹泻病犬CPV发病率高达58.0%。究其原因，最大可能在于基因型改变导致疫苗免疫无法提供有效保护或是疫苗株毒力返强所致。虽然犬细小病毒是无囊膜的单股DNA病毒，但其易经过抗原漂移产生新的突变株，目前在中国已经发现CPV-2a、CPV-2b、CPV-2c（2008年后发现）三个基因型流行，但由于缺乏必要的分型检测方法，仅依靠基因测序，尚无法对其分子流行病学进行快速、系统的研究，因此也无法对疫苗的安全有效性进行合理评估。

     ②技术原理及性能指标：PCR-高分辨熔解曲线分析技术(HRM)是一种简单、快速、低成本、高通量的PCR扩增后检测技术，目前在该技术的基础上已经衍生出单核苷酸多态性分析(SNP)-HRM、小片段扩增（SA）-HRM、非标计探针（UP）-HRM、分子信标（MB）-HRM 等多种熔解曲线分析方法，尤其是分子信标（MB）-HRM 可以实现不同基因型高通量分型检测。多年来，本课题组通过和澳洲HRM技术成熟的科研机构合作，采用引进—消化吸收—再创新的模式已成功搭建动物疫病HRM 分子鉴别诊断分析平台，为本项目的实施提供了技术保障。

    ③技术的创造性与先进性：犬细小病毒的进化速度接近于RNA病毒，对其基因型进行有效的跟踪及当前疫苗株对流行毒株的保护力进行评估一直成本难点，本项目首次将熔解曲线分析技术应用于犬细小病毒的分型检测，在国外相对较成熟的HRM技术基础上创造性建立了基于探针法的熔解曲线分析技术。

     ④技术的成熟程度，适用范围和安全性：该技术目前处于实验室研发应用阶段，可适用于具有稳定SNP分型位点的疾病检测分型，应用到常规分子试剂及仪器，安全性较高。

     ⑤应用情况及存在的问题：目前项目研发诊断方法在临床试用阶段，需要加大临床使用数量，开展大范围验证工作。

    ⑥历年获奖情况：还未进行各类奖项申报。