成果名称: 基于可再生资源的石墨烯纳米材料高效检测分离金花茶活性成分
完成单位: 韶关学院
主要人员: 程金生,陈晓远,钟瑞敏,钟声,范文明,钟鸣,万维宏,武映梅,张志顺,莫韶斌
介绍:

    岭南地区金花茶资源丰富,但深加工程度很低,且传统紫外光谱、色谱检测或溶剂浸提、膜分离等活性成分检测或分离方法存有分析灵敏度差、检测限高、分离效率低和实验结果重现性难度大等一种或多种不足。项目通过引入前沿石墨烯纳米技术,实现氨基酸、茶多酚、齐墩果酸等多种金花茶活性成分高灵敏检测或高效分离研究,最大程度提高检测灵敏度,降低检测限,提高结果重现性;提高黄酮类物质、氨基酸等金花茶活性成分分离效率,并基于所分离活性成分进行抗氧化、降血糖及降血脂产品等开发研究,实现金花茶高值化利用。

    成果以梅州、韶关等地区丰富的谷壳、甘蔗渣、玉米秆等可再生生物质为原料制备低成本石墨烯纳米材料。并利用该类纳米材料、结合基质辅助飞行时间质谱、搅拌棒萃取吸附-气相色谱-质谱联用、顶空搅拌棒萃取吸附-气相色谱质谱联用等技术高效检测金花茶中黄酮、茶多酚、氨基酸等活性成分,并利用石墨烯纳米技术实现金花茶中氨基酸、黄酮等活性物质,硒、铁等微量元素高效富集、分离,以所分离活性成分为原料开展抗氧化研究以及降脂降糖制剂开发研究。具体包括如下一系列理论及应用研究:

     1、应用基于石墨烯新型涂层或基质的搅拌棒萃取吸附-气相色谱-质谱联用技术(SBSE-GC-MS)、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)高灵敏检测金花茶中氨基酸、表儿茶素、棕榈酸,挥发性精油成分等;应灵敏检测金花茶中各类氨基酸、茶多酚等活性成分;这些技术均在国际、国内首次应用到金花茶研究中,大幅提高金花茶活性成分检测灵敏度,降低检测限,提高结果的重现性。团队由谷壳等可再生资源出发制备的石墨烯纳米材料在这些检测方法中扮演了重要角色。

     2、构建了一种L-赖氨酸选择性检测石墨烯电化学传感器。该传感器通过选用了不同石墨烯纳米材料为增敏材料;利用Rheinheimera sp.等不同L-赖氨酸氧化酶修饰电极;通过三电极体系构建L-赖氨酸选择性检测石墨烯电化学传感器。实现对金花茶中L-赖氨酸的选择性检测,以获得金花茶花、叶、果等不同部位L-赖氨酸选择性精确含量信息。该技术应用到金花茶领域尚为首次。

    3、开发了一种复合纳滤膜,并以金花茶等植物萃取液为例,研究了中基于上述纳滤膜的金属元素富集分离方法,通过制备聚酰胺-胺型树状大分子复合纳滤膜,金花茶萃取液,再将复合纳滤膜用于富集分离金花茶中金属元素,得到金花茶金属元素萃取浓缩液;将所得金花茶水相萃取浓缩液经电感耦合等离子体原子发射光谱法、原子荧光光谱或电感耦合等离子体质谱技术进行检测,以获得金花茶中各金属元素含量精确数据。金花茶领域该工作在国际、国内未见其它报道。

     4、在国际上首次基于石墨烯纳米技术实现了金花茶中不同氨基酸高效梯次分离。通过调节金花茶提取液pH值及石墨烯纳米材料表面电荷,使浸提液中不同氨基酸活性成分依次带正电,向带负电的石墨烯膜或功能化石墨烯移动,从而达到吸附分离的效果。金花茶浸提液中茶多酚、茶多糖、黄酮类成分、亚油酸、微量元素等不带电荷,不会被石墨烯吸附。也通过制备具弱碱性的氨基化石墨烯等纳米复合材料,实现金花茶等植物中弱酸性黄酮类物质(如黄酮、黄烷醇、异黄酮、双氢黄酮、双氢黄酮醇、黄烷酮、花色素、查耳酮、色原酮等等)高效吸附分离。

     5、以所分离的茶多糖、茶多酚、黄酮等各类金花茶活性成分,开发了一系列金花茶降脂、降糖制剂。该部分工作在保持最优化药效配伍比例基础上进一步与聚乙二醇、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、枸橼酸三脂等药物辅料混合制备包括缓释、控释制剂在内的各种丸剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂等,提高金花茶降脂降糖药效,减少给药频率,排除杂质组分对药效或保健功效的影响,增强金花茶降脂降糖活性成分的人体相对生物利用度及安全性,提高患者的顺应性。为国内、国际上首次金花茶降脂、降糖制剂的报道。

     6、由金花茶中高效分类皂苷类活性成分,并通过体外抗氧化实验,以维生素C为对照品,分别开展所分离皂苷成分对羟基自由基(·OH)、有机自由基DPPH·、超氧阴离子(O2-·)、亚硝酸根离子(NO2-)等清除能力研究,是一种天然的自由基清除剂。项目也联合企业,基于金花茶总皂苷良好的抗氧化能力开发下游抗氧化颗粒冲剂等相关产品,应用前景广阔。

    成果为金花茶高值化应用及高灵敏检测提供核心技术支持,促进金花茶类药品或保健食品品质控制,且可延长梅州、韶关等地区富产谷壳、甘蔗渣等可再生资源产业链,符合经济、社会可持续发展的要求,利于精准扶贫及百姓增收。 成果目前已授权本领域中国发明专利8项,授权美国PCT专利3项,在国内外发表论文12篇(含SCI 3篇,EI 1篇),完成广东省科技成果登记3项,获国家行业协会优秀奖1项,完成《客家中草药图鉴及民间验方》专著1部,与苏州碳丰石墨烯科技有限公司、深圳未名湖科技有限公司、韶关市兴尚农科技服务有限公司、广东琼露健康科技有限公司等企业对本成果进行了产学研合作及成果应用,近三年实实现销售收入3373万元,利税1137.85万元,并带动本地金花茶种植、加工企业和农户致富,实现了较好的经济和社会效益。

批准登记号:
登记日期: 2019-08-05
研究起止时间: 2016-06-01至2019-05-07
所属行业: 农、林、牧、渔业
所属高新技术类别: 新材料
评价单位名称: 广东省科学技术厅
评价日期: 2019-07-13