| 成果名称: | 基于酵母表面展示系统的鲤疱疹病毒3型亚单位疫苗的制备与免疫研究 |
| 完成单位: | 广东省农业科学院动物卫生研究所 |
| 主要人员: | 刘振兴,郝乐,柯浩,梁志凌,马江耀,马艳平,李仕成 |
| 介绍: | 本项目将CyHV-3 ORF65、ORF131、ORF148 基因插入pYD1-E 载体，构建重组质粒，转化酿酒酵母EBY100，构建酵母细胞表面展示系统。采用rProteinG 亲和层析纯化鲤血清IgM，免疫小鼠制备抗鲤的多克隆抗体。在B 细胞表位预测的基础上，采用pET-32a/大肠杆菌BL21 原核表达系统分别重组表达CyHV-3 pORF65、pORF131、pORF148 抗原表位优势区段。将上述表达蛋白作为包被抗原，小鼠抗鲤多克隆抗体为检测抗体，建立了pORF65、pORF131、pORF148 鲤血清特异性抗体检测的间接ELISA。比较了ORF65、ORF131、ORF148 作为DNA 疫苗的免疫保护效果，结果表明3 种疫苗均可以提高免疫建鲤血清特异性抗体水平，提高免疫相关基因的表达水平。以ORF131 为基础构建亚单位疫苗、DNA 疫苗，分别采用口服、注射以及联合免疫等3 种方案免疫建鲤，抗体检测表明，3 次免疫后鲤血清特异性抗体水平逐步升高。ORF131 亚单位疫苗、DNA 疫苗采用不同免疫方案免疫建鲤后，攻毒保护试验证实，其相对保护率可以达到53.33%-66.67%。 |
| 批准登记号: | |
| 登记日期: | 2020-07-16 |
| 研究起止时间: | 2016-01-01至2018-12-31 |
| 所属行业: | 农、林、牧、渔业 |
| 所属高新技术类别: | 现代农业 |
| 评价单位名称: | 广东省科学技术厅 |
| 评价日期: | 2020-05-12 |
