牙髓炎和根尖周炎是目前口腔临床上最常见的疾病，而其诊治一直以来都是依赖于根管治疗技术及其相关辅助设备的发展，随着近年来再生医学和组织工程学的发展，牙体牙髓病治疗与研究的热点也逐渐聚焦到牙髓再生这个概念上，即牙髓的再生或牙的再生。

    牙髓再生，其关键在于干细胞的成牙分化、三维结构形成和血运的构建。本项目拟通过牙髓干细胞与血管内皮前体细胞3D共培养解决后面两个问题。前期实验结果证明了将转染了 VEGF/SDF-1 过表达基因的血管内皮前体细胞与人牙髓干细胞共培养，能有效的促进血管生成，并且此共培养物对于牙髓干细胞的成牙本质向分化能力具有促进作用。本项目的研究重点为细胞和动物层面探索 miR-586 对干细胞成牙分化的调控作用及其机制。

    本实验将构建miR-586表达抑制的慢病毒，并将其转染入牙髓干细胞中且稳定表达。将此稳定转染的牙髓干细胞与内皮前体细胞进行共培养，分别对共培养物进行矿化诱导及成血管诱导培养，观察其各项矿化特性及血管形成特性，观察miR-586表达抑制处理后的共培养物，是否能在不影响内皮前体细胞血管生成特性的基础上，同时促进共培养物向成牙本质细胞向分化。旨在让miR-586表达抑制人牙髓干细胞和内皮前体细胞的共培养物既能促进成牙本质向细胞分化，又不影响其血管新生的能力，并将此细胞共培养模型作为牙髓再生后续实验的理想细胞组合。

    理论成果：本研究成功构建了miR-586表达抑制人牙髓干细胞/内皮前体细胞的细胞共培养模型，可作为较好的牙髓再生种子细胞组合，用于牙髓再生研究。研究结果发现:内皮前体细胞共培养及miR-586表达抑制的同时应用，对于定向诱导人牙髓干细胞向成牙本质细胞分化具有协同促进作用。将内皮前体细胞与人牙髓干细胞进行直接接触共培养，能促进人牙髓干细胞的成牙本质向分化。另一方面，miR-586表达抑制对于人牙髓干细胞/内皮前体细胞共培养中的成血管特性有间接促进作用。将人牙髓干细胞与内皮前体细胞进行直接接触共培养，能促进内皮前体细胞的血管新生。以上结论为牙髓再生的后续实验 提供了较好的理论基础，有助于后续体内实验的深入研究。

    科研成果：通过本项目资助发表论文 21 篇，其中 SCI 收录 6 篇。 人才培养成果：通过本项目资助，共培养博士 6 名、硕士 11 名。