成果名称: 盐酸克伦特罗与莱克多巴胺残留检测免疫荧光试纸条
完成单位: 暨南大学
主要人员: 唐勇,王宏,杨红宇,向军俭,刘茜,崔浩,黄晓明
介绍:

    一、课题来源与背景; 猪肉中盐酸克伦特罗与莱克多巴胺残留危害消费者健康,市场急需快速敏感的普查技术。目前常用的免疫学普查方法主要有ELISA 与胶体金试纸条法。然而,ELISA 敏感,但耗时1-2 小时;胶体金试纸条法简便快速,仅需2-3 分钟,但敏感度为ELISA 的1/10。本研究筛选应用稳定的纳米荧光颗粒偶联抗体,在侧向层析条上完成免疫学检测反应,开发出兼具ELISA 技术与胶体金试纸条优势的既敏感又简便快速的免疫荧光试纸条,为我国猪肉中盐酸克伦特罗与莱克多巴胺残留监测提供新型有效的检测技术和产品。

    二、技术原理及性能指标; 利用免疫化学方法合成出检测抗原 RAC-BSA。共价偶联合成得到了荧光微球抗体复合物,该复合物与检测抗原有很好的结合,且与 BSA不存在非特异性结合。利用免疫竞争法建立了 RAC 荧光快速检测方法,制备出了 RAC 荧光微球免疫层析试纸条,该试纸条检测猪尿中 RAC 的残留,灵敏度最低值为 2ng/mL,与克伦特罗(CL),沙丁胺醇(SAL)等类似物无交叉反应。 在胶体金试纸条的平台上,根据荧光共振能量转移(FRET)的原理,建立了一种新型的盐酸克伦特罗、莱克多巴胺荧光猝灭试纸条。该方法制备简便,可转换检测信号和提高灵敏度。在本研究中,建立的盐酸克伦特罗、莱克多巴胺荧光记猝灭试纸条的最低检测限可分别达到 0.04 和 0.31 ng/mL,且荧光信号与样品浓度正相关。该方法对比胶体金试纸条有较多的优势,如更灵敏,得到的结果数值与样品浓度呈正相关,配合读条仪可定量检测。

    三、技术的创造性与先进性; 利用荧光共振能量转移(FRET)的原理,建立了一种新型的盐酸克伦特罗、莱克多巴胺荧光猝灭试纸条,该试纸条灵敏,特异,信号正向读取,容错率高。

    四、技术的成熟程度,适用范围和安全性; 技术已基本成熟,可适用于多种食品安全小分子的检测试纸条开发,安全性好。

    五、应用情况及存在的问题; 已经应用在盐酸克伦特罗、莱克多巴胺残留及重金属离子的残留检测上。

    六、历年获奖情况; 第三届中国食品产业产学研创新发展高峰论坛优秀科研成果奖三等奖“双标记高灵敏免疫荧光(竞争)试纸条检测技术”,2013年12月。

批准登记号:
登记日期: 2020-11-18
研究起止时间: 2011-06-30至2014-12-30
所属行业: 农、林、牧、渔业
所属高新技术类别: 现代农业
评价单位名称: 广东省科学技术厅
评价日期: 2014-12-31