1. 垂体瘤是颅内最常见的肿瘤之一，缺乏有效的NFAs治疗药物。合作单位美国哈佛医学院-麻省总医院首次发现MEG3基因在NFAs中特异性表达缺失，提示其在NFAs的发生发展中发挥重要作用。我们前期发现，MEG3可抑制PDFS增殖，阻滞细胞在G1期，通过与p53启动子结合，促进p53的表达，增强其抑癌作用。本研究拟探讨NFAs的发生机制，为临床精准治疗提供可参考的靶点，也为NFAs的早期诊断提供理论依据。

    2. 近年来，lncRNA 已经成为肿瘤研究的新热点，MEG3基因是具有抑癌作用的lncRNA。MEG3在垂体、大脑半球、胰腺、脾脏等多种正常组织中高表达,而在胶质瘤、肺癌、肝癌、头颈癌等多种肿瘤组织中低表达，其水平与肿瘤的分级及患者预后密切相关。Zhang等发现MEG3在垂体瘤中较正常垂体组织明显低表达，并且在NFAs 中特异性表达缺失。P53是MEG3的靶基因，外源性的转染MEG3可明显上调p53，并增强p53依赖的启动子的转录。同时，MEG3选择性上调p53下游靶基因GDF15的表达，增强其抑癌作用。然而MEG3通过P53介导下游靶基因对 NFAs 的生长和凋亡的影响却未见报道。

    3. (1)利用Cre-LoxP重组酶系统及四环素诱导调控表达系统构建了MEG3过表达及对照质粒。 (2)成功挑取MEG3的稳转p53+/+HCT116细胞株，且该过表达系统在体外实验中成功应用，证明了过表达MEG3对细胞增殖、迁移及侵袭的影响。 (3)明确人垂体瘤标本中MEG3 与 P53下游靶基因的靶向调控关系。发现MEG3与miR-223-3p存在两个结合位点，且miR-223-3p与MEG3、miR-223-3p与P53有相同的结合位点，并用双荧光素酶报告基因检测实验证实了MEG3、miR-223-3p与P53之间的靶向调控关系。 (4)通过流式细胞术，TUNEL染色，Western Blot，细胞克隆实验，Transwell小室侵袭及迁移实验，划痕实验等明确了MEG3与miR-223-3p对细胞增殖、侵袭和迁移的影响。

    4. 创新点 1）MEG3 是本研究合作单位在全球首次克隆鉴定，并随后对其结构、功能以及它在人脑肿瘤及癌症发病过程中的作用进行了一系列深入细致的研究，从而首次证明了特定功能性大分子非编码核糖核酸的抗肿瘤活性，因此在国际学术界开辟了功能性大分子非编码核糖核酸在癌症中的作用这一个全新的研究领域。合作单位首次发现在 DLK1 区域内 MEG3 在 NFAs 中的作用，该项目将研究 MEG3 与其相关蛋白组成的调控网络在 NFAs 中的作用，为 NFAs 的研究提供了一种新的研究策略。 2）首次利用 Cre-LoxP 重组酶系统及四环素诱导调控表达系统构建MEG3 过表达及对照质粒。目前，尚无此种较为完善的调控 MEG3-GFP 过表达系统。 3）利用 P53 野生型和突变型的一组细胞系，首次探讨了 MEG3 基因及P53 下游靶基因对无功能垂体瘤发生发展所起的调控作用。 本研究通过体外实验证明，从 MEG3、P53 与下游靶基因的关系入手，揭示影响 NFAs 的分子机制，为临床治疗提供理论依据，为精准治疗 NFAs 提供新的靶点。

    5.本项目研究成果对垂体腺瘤的治疗有明确的指导意义。本成果明确了MEG3与miR-223-3p、P53与miR-223-3p的靶向关系，证实其对细胞增殖、迁移及侵袭的影响，为垂体腺瘤的治疗提供了新的可能的靶点，并为功能性大分子非编码核糖核酸在癌症中的作用这一个全新的研究领域添上了浓墨重彩的一笔。

    6.本项目申请专利1项、已发表5篇SCI论文。