①课题来源与背景；项目来源于广东省科技计划。甲型血友病(Hemophilia A，HA）发病率约为1/5000男性。有40%-45%的重型甲型血友病患者由FVIII内含子22倒位(Inv22)所致，患者可因颅内出血致死或关节腔出血、血肿机化，致残。多囊肾（PKD）包括：常染色体显性多囊肾（ADPKD）和常染色体隐性多囊肾（ARPKD）。ADPKD的发病率为1/400-1/1000，属迟发显性遗传，患者多于成年期发病，此时多已将致病基因传给下一代。 ARPKD的发病率约为1/20000，携带率约为1:70。PKD的结局是致死性的肾功能衰竭。目前对重型甲型血友病的治疗是输注FVIII。若患者长期输注FVIII可产生抗血友病球蛋白同种异体抗体或抑制物严重影响疗效。目前对多囊肾所致肾功能衰竭的治疗方法是血液透析及肾脏移植。血液透析影响患者的生活质量、增加个人及家庭经济负担；而肾脏移植的临床应用受限于肾源困难及排异反应。

     ②研究目的与意义；由于目前对这两种病尚无有效的根治方法，故建立有效的重型甲型血友病及多囊肾的基因诊断、产前诊断和种植前诊断技术平台十分必要。预期可应用于临床，降低这两种遗传病的患病率及致病性等位基因频率，对防止新患儿出生、降低出生缺陷率，减少有害基因的垂直传递具有重要的临床意义。同时，进一步丰富中国人甲型血友病及多囊肾的致病基因变异谱，为阐明这两种遗传病的分子病理机制奠定基础，具有一定的科学意义。

    ③主要论点与论据: 目标区域测序、倒位PCR及Long—PCR研究重型血友病FVIII第22内含子倒位的重组分子结构及重组热点，可有效地建立INV22倒位重型甲型血友病的产前诊断和种植前诊断技术平台；应用PKD全外显子测序检出多囊肾突变，根据ACMG/AMP遗传变异分类标准与指南，进行突变的致病性鉴定。据此可建立有效的多囊肾的基因诊断、症状前诊断、产前诊断和种植前诊断的技术平台。

     ④创见与创新：a) 本研究进一步完善现有甲型及乙型血友病的基因诊断/产前诊断/种植前遗传学诊断的体系，并应用于临床。成功地对17个血友病家系进行基因诊断、对7例胎儿进行产前诊断及为2例母亲是甲、乙型血友病携带者的胚胎进行了种植前遗传学诊断。我们首次应用Karyomapping芯片技术结合直接测序的方法成功进行了HB的种植前诊断，并将Karyomapping芯片技术与传统的PGD方法的结合建立了一个更全面的HB种植前诊断体系。我们还应用第二代测序技术和SNP array对寻找FVIII Inv22的断裂重组点进行了探索性研究，为进一步研究新的诊断技术奠定了基础。b)本研究按照ACMG国际指南，基于临床资料、遗传学检测和生物信息学分析的综合应用，建立了快速筛查 PKD1、PKD2 和 PKHD1 基因变异和对发现的新变异进行致病性鉴定的综合方法，促进了 PKD 的产前诊断和症状前诊断的有效开展。我们共为15个中国汉族家系进行了多囊肾基因的筛查，共发现了17个新突变，其中位于PKD1 基因上突变10 个和位于 PKHD1 基因上7个新变异。根据ACMG国际指南，将这些新变异的致病性分为致病性 6 个，可能致病性 4 个，致病性不确定性 7 个，经随访证实了这些变异分类的准确性。本研究证实了常染色体显性多囊肾不仅发生在成人,也可在胎儿期发病，该新观点得到国际同行认可。常染色体显性多囊肾具有迟发显性，我们能做到症状前诊断，及时治疗，减缓病情的发展。我们已为两个家系进行了产前诊断，为一个家系进行了症状前诊断。同时我们在12个废弃的卵裂球中证明了多囊肾胚胎植入前诊断检测的可行性。我们的研究也对多囊肾的发病机制，功能学的研究和阐明基因突变与临床表型的关系提供了参考。本项目负责人以通讯作者发表SCI论文四篇。

      ⑤社会经济效益，存在的问题：血友病和多囊肾均为严重影响人类健康的遗传病，预计本项目在临床有较好的推广应用前景，可以减低重型HA及HB患儿的出生率，在降低我国出生缺陷率方面具有一定的社会效益。减轻国家对罕见病诊治的负担，减轻家庭的经济和人力负担。

    ⑥历年获奖情况：本项目尚未获奖。