一、课题来源与背景： 猪链球菌(Streptococcus suis，SS)是一种重要的人畜共患病病原，是链球菌属。SS呈世界性流行，对养猪行业和公共卫生安全造成重大的威胁。按荚膜抗原的特性，目前分为35个血清型(1一34型和1/2型)，其中1型、2型(1/2型)、7型、9型的致病力最强。近几年来，SS2多次引起猪链球菌病的暴发，并可感染人致死，成为当前重要的人畜共患病之一。本研究对华南地区2006-2015年猪链球菌流行病学调查结果显示：华南地区猪群中广泛存在SS，有多个血清型菌株流行，传统的分型如生化特性、血清学方法耗时费力，具有很大局限性。不同血清型之间交叉保护力较差也使得商品化疫苗免疫效果十分不理想。因此，建立快速分型鉴定技术和研制地方流行菌株匹配的疫苗对预防和控制该病具有重要的意义。

    二、技术原理及性能指标： 1、建立了猪链球菌的交叉等温扩增-侧流层析检测方法，该检测方法的最低检测限为44CFU，与PCR方法的敏感性相同，该技术实现结果的可视化判定，预期研制可满足兽医基层需求的新型可视化快速检测试剂盒。 2、建立了猪链球菌 2、7、9 型PCR-HRM检测方法，该方法的灵敏度最低可检测到103 拷贝/μL的样品浓度。 3、猪链球菌二价灭活疫苗（2型+9型）的研究 1）建立基础种子批：筛选毒力最强，培养特性稳定，免疫原性优秀，传代稳定的菌株建立基础种子批，为其疫苗研究奠定了坚实的基础。2）猪链球菌高密度发酵技术的研究：研究细菌疫苗的全自动生物反应器高密度发酵技术，通过对营养液、溶氧浓度、培养温度、PH值和补料方式等发酵条件进行优化，以提高单位产品产量，实现抗原高效生产，提高疫苗有效成分。3)新型佐剂和免疫增强剂的研究：制苗菌株甲醛灭活后，分别选择铝胶、蜂胶和新型佐剂CpG等制备灭活苗。利用免疫保护和抗体滴度试验，筛选出适用于猪链球菌灭活疫苗的高效佐剂。4） 疫苗安全性及免疫保护效力的研究：研究疫苗的安全性、最小免疫量、免疫产生期、免疫持续期等指标，并据此制订合理的免疫程序；通过攻毒保护试验，确定血清抗体效价与攻毒保护的相关性。

    三、技术的创造性与先进性： 1、建立了猪链球菌的交叉等温扩增-侧流层析检测方法，该检测方法的最低检测限为44CFU，与PCR方法的敏感性相同，该技术实现结果的可视化判定，预期研制可满足兽医基层需求的新型可视化快速检测试剂盒。 2、我们国内猪链球菌的流行毒株主要为2型(1/2型)、7型、9型，该项目研究的2+9型猪链球菌疫苗能够有效的防控疫病的发生，而且填补国内市场空白。

    四、技术的成熟程度，适用范围和安全性： 1、猪链球菌检测技术方法属于相对成熟阶段，可以通过市场大批量进行验证。 2、猪链球菌2+9型灭活疫苗安全性良好，可以组织材料申报新兽药证书。

    五、应用情况及存在的问题： 检测方法和猪链球菌2+9型灭活疫苗都属于生物制品管控范畴，需要申报新兽药证书后方可再市场推广应用。