本课题为国际（地区）合作与交流项目（组织间合作研究，国家自然科学基金委员会-澳门科学与技术发展基金委员会（内地-澳门）），合作单位为澳门科技大学，本单位研究经费104.15万全部由中国国家自然科学基金委员会提供和支持。

    禽类是流感病毒的天然宿主，禽流感病毒通过跨种属传播持续危害人类健康，了解其传播机制对于寻求有效干预手段具有重要意义。禽流感病毒与人类呼吸道唾液酸糖基受体的结合是病毒实现跨种属传播的前提，这种识别过程受到宿主唾液酸糖基受体糖基的复杂影响。过往技术存在诸多局限，尚未能全面揭示唾液酸糖基受体的结构多样性以及与流感病毒结合的糖链结构特征。

    呼吸道上皮细胞表面神经氨酸（唾液酸）作为流感病毒受体，是禽流感跨种属感染的重要屏障。提高对呼吸道寡糖的认知，对了解流感病毒跨物种传播机制有重要意义。本研究拟利用糖组学最新分析技术，研究与人禽流感病毒蛋白特异性结合的鸡和人唾液酸糖基受体糖组学特性，并进一步研究其在病毒感染中的作用。进而对具有抗流感活性的中药进行筛选，挖掘出对人呼吸道唾液酸糖基受体有干预作用的新中药单体。研究将为唾液酸糖基受体在禽流感病毒跨种属传播的重要性以及干预措施的制定提供更完善的理论依据。

    本研究成果主要为：1、构建了灵敏度更高的分析体系：TiO2-PGC 芯片-nano-LC/ESI-Q TOF-MS，可对寡糖进行在线富集后分析。2. 揭示了从禽-哺乳类-非人灵长类-人类呼吸道糖链的差异，分析了鸡、雪貂、树鼩到人类不同物种呼吸道糖链特征。利用近非人灵长类动物树鼩模型，分析呼吸道寡糖特征，阐析了鼻甲骨、软腭、气管、支气管和肺N-寡糖的差异，发现鼻甲骨和肺寡糖的多样性最高。3、利用上述糖基化分析方法及其潜在生物学意义，阐明了中药新的抗病毒机制：从中药提取出65种中药成分，筛选出6种有效成分，首次阐明了板蓝根吲哚醛可影响流感病毒与细胞表面糖基的结合。综上，本项目构建了TiO2-PGC 芯片-nano-LC/ESI-Q TOF-MS技术体系，发现并首次阐释了树鼩呼吸道唾液酸相关寡糖的糖组特征，丰富了从禽到人呼吸道糖链差异的科学认识。

    课题基于上述基础研究理论，应用于中药抗流感成分靶向宿主糖基化影响侵入的抗病毒新机制研究并在板蓝根有效单体取得突破。研究成果发表SCI论文9篇，培养青年老师1名，培养硕士研究生2名。

    本项目虽然完成原定计划，但依然存在问题：（1）由于本项目是首次粤澳联合基金，澳门科学与技术发展基金委员会有独立的项目编号（023/2016/AFJ to J.R.W），粤澳双方项目组在处理研究文章标注时没有经验，分别使用了各自地区基金委的项目编号，没有同时标注两个地区的项目编号，但两个编号属同本研究项目。（2）本研究建立了钓糖实验方法学，但未开展对人呼吸道糖组分钓取实验，因为目前项目组未能获得足够的人组织标本，详细原因见下（3）。（3）本项目使用的人呼吸道组织标本，要求没有病理改变的正常组织，项目启动后两年内仍未能获得合适的组织标本。 为完成项目目标，项目组遵从临床伦理，在获取的病理组织中，剪取病变旁的正常组织用于本项目研究。截至2019年10月，分别收集得 5 例肺组织和 5 例气道黏膜，数量仅足够用于糖组学特征分析，未能提取组织糖组分开展钓糖实验。研究组将继续收集合适的组织标本，以求揭示人呼吸道组织中与流感病毒存在相互作用的寡糖结构。