1、课题来源与背景：课题来源于广东省科技计划项目，专项资金80万，自有资金1047.76万。由于抗生素的广泛使用导致出现了越来越多的超级细菌，严重威胁人类和禽畜的健康。随着农业部发布“禁抗令”，寻找新型的抗菌物质成为畜牧业关注的热点。抗菌肽因具有高效杀菌活性和独特的作用机制，被认为是可安全使用的新型抗菌物质之一。抗菌肽菌丝霉素（Plectasin）是从腐生子囊菌 (Pseudoplectania nigrella) 分离得到的首例真菌防御素，对革兰氏阳性细菌具有广谱抗菌活性，其功能活性、作用机理、结构改造及药代动力学分析等方面已有广泛的研究，为菌丝霉素的应用奠定了坚实的理论基础。

    2、技术指标：（1）构建的抗菌肽工程菌能高效、稳定的表达抗菌肽，表达量达 30000U/ml;
（2）提高热稳定性，100℃灭活 30 分钟，抗菌肽杀菌效价保持 90%以上，热稳定性好，可高温灭火，防止菌体及质粒扩散;
（3）经原材料及配方工艺、菌种筛选，工艺技术优化，发酵液中生物活性抗菌肽蛋白表达量达 5mg/ml;
（4）抗菌肽制剂工艺的设计与优化，产品质量稳定，常温储存一年，生物活性保持不变。经济指标∶本项目实施达产后实现年产 200 吨抗菌肽制剂产品（富力泰∶ 2000U/g），实现年销售额 3200 万，利税 960 万。随着生产规模的扩大和生产技术的不断完善，后期投入销售市场开拓的费用降低，单位总成本还可有一定的下降空间。

    3、技术的创造性与先进性：（1）抗菌肽重组工程菌的构建 本项目抗菌肽基因根据天然抗菌肽的氨基酸序列，以柞蚕抗菌肽A 的 1-11 位氨基酸及抗菌肽 D 的 12-37 位氨基酸合并为杂合肽 AD， 同时采用点突变的方法使第 37 位的赖氨酸改变成天门冬酰胺，保持天然的 C-端酰胺基结构，提高了杀菌效价及稳定性，而其基因启动子ａ-factor 及其前导序列将菌体合成的抗菌肽分泌到细胞外，有利于抗菌肽的分离及有效作用的发挥。 （2）抗菌肽重组工程菌的高效表达 以工程菌工业化发酵生产抗菌肽，发酵周期短，发酵过程稳定可控，发酵液生物活性高，可规模化生产，生产成本低，产品质量稳定， 且不受季节和气候变化等外在环境的影响。本研究通过对重组工程菌培养基配方及发酵条件的优化，提高抗菌肽表达水平，降低发酵成本。 （3）抗菌肽稳定化制剂工艺的研究 基于抗菌肽分子量小、多为带正电荷多肽，半衰期短的特点，开展抗菌肽微囊化研究，相对延长抗菌肽体内半衰期，实现抗菌肽体内缓控释，为抗菌肽奠定良好的药用基础。针对不同重大疾病的特点及给药方式的差异，对纯化的抗菌肽进行制剂工艺筛选，筛选能有效保护抗菌肽活性的制剂配方工艺，使抗菌肽效价能保持 90%以上。

     4、技术的成熟程度，适用范围和安全性：技术已成功进行了成果转化并实现了产业化生产；替代抗阴性菌的抗生素，对革兰氏阴性菌有很强的杀菌力；无毒无残留。

    5、应用情况： 本项目形成一个抗菌肽产品，其安全、低毒、低残留， 具有超强的稳定性，具有热稳定性，可耐受饲料制粒时的高温而不失活；抵抗胰蛋白酶或胃蛋白酶水解，保证其经消化道不被破坏；在较宽的pH 值范围内可保持较强的活性。 目前该产品有粉剂和液体制剂两种剂型，可用于畜禽、水产动物中，能有效解决腹泻，对大肠杆菌、绿脓杆菌、沙门氏菌等细菌和痢疾阿米巴原虫有明显的抑制消灭作用，显著降低乳仔猪黄白痢、红痢、 传染性胃肠炎以及流行性腹泻的发病机率，还可显著增强免疫，刺激动物机体产生天然的免疫反应，提高机体免疫应答能力、抗体水平， 并可连接先天性免疫与获得性免疫，同时可高效结合并清除肠道内的霉菌毒素、细菌毒素。 该产品已经得到广大用户的认可，包括正大集团、新希望集团、通威股份、双胞胎集团、大北农集团、安佑集团等大型饲料企业，并与其建立了长期的合作关系。