| 成果名称: | cripto/grp78复合物参与EMT促肺癌转移的分子机制及益气除痰方干预作用 |
| 完成单位: | 广州中医药大学 |
| 主要人员: | 林丽珠、周京旭、黄学武、孙玲玲、郑心婷、陈汉锐、关洁珊、翟林柱、陈昌明、李元滨、欧阳明子、方若鸣、杨建猛、李佳殷、张景涛、杨文娟 |
| 介绍: | 1.课题来源与背景: 本研究来源于广东省自然科学基金项目（cripto/grp78复合物参与EMT促肺癌转移的分子机制及益气除痰方干预作用）。前期蛋白质组学结果显示益气除痰方可能调控内质网应激与上皮间质转化，文献分析表明内质网应激grp78与上皮间质转化密切相关。 2.研究目的和意义: 采用体内外双水平实验，探索益气除痰方下调GRP78抑制EMT发生的作用机制，为揭示缺氧微环境下肿瘤细胞发生 EMT的分子机制及中药复方抑制EMT的作用机理提供理论和实验依据。 3.论点与论据: 方法构通过构建A549细胞缺氧模型，RT-PCR检测EMT相关转录因子，Western blot检测EMT相关信号蛋白表达。构建GRP78质粒转染A549细胞以沉默GRP78表达，结合蛋白特异性抑制剂干预作用，探索缺氧微环境下细胞发生EMT的分子机制及益气除痰方逆转EMT的机理。构建裸鼠A549肺癌移植瘤模型，观察益气除痰方的抑瘤率及转移抑制率，免疫组化检测瘤体组织EMT相关信号蛋白表达，以探索益气除痰方体内逆转EMT机制。 结果显示通过成功构建A549细胞缺氧模型诱导细胞EMT发生，而益气除痰方干预可明显逆转细胞EMT的发生。综合分析，质粒转染沉默GRP78并结合蛋白特异性抑制剂干预后的WB分析结果显示，GRP78/smad2/3以及GRP78/SRC/MAPK可能是缺氧微环境下引起肿瘤细胞发生EMT的重要蛋白信号通路，益气除痰方通过多靶点抑制GRP78/smad2/3以及GRP78/SRC/MAPK等信号通路来实现对EMT的逆转作用。动物实验结果显示，益气除痰方明显抑制小鼠肺癌的转移，转移抑制率为39.6%。免疫组化结果显示，益气除痰方体内抑制肺癌转移的机制与多靶点抑制GRP78、smad2/3、MAPK的活性有关。 4.创见与创新: 本研究主要有两点创新：1.肺癌细胞在缺氧微环境下可发生EMT， GRP78/smad2/3以及GRP78/SRC/MAPK是缺氧微环境下肺癌细胞发生EMT的重要蛋白信号通路。2.益气除痰方在体内外可抑制肺癌细胞EMT的发生，其对EMT的逆转作用与多靶点抑制GRP78/smad2/3以及GRP78/SRC/MAPK等信号通路有关。 5.社会经济效益: 本项目的研究结果，为中药在晚期肺癌中的应用提供了科学依据，在临床中提高患者生存质量，并具有良好的经济效用比。相关的复方药物已经进行标准化研究，开发为院内制剂，适合推广应用于晚期肺癌。 |
| 批准登记号: | 粤科成登（2）字【2017】0294 |
| 登记日期: | 2017-09-25 |
| 研究起止时间: | 2012.10 至2015.10 |
| 所属行业: | 卫生和社会工作 |
| 所属高新技术类别: | |
| 评价单位名称: | 广东省自然科学基金委 |
| 评价日期: | 2015.10.01 |
